Онлайн-семинар
Школа хроматографиста: ВЭЖХ. Базовый курс

Что такое хроматография и хроматографический процесс

Классификация методов разделения в химическом анализе

Причины быстрого развития ВЭЖХ и ее преимущества перед другими видами анализа

Области применения ВЭЖХ

Общая схема хроматографического разделения и жидкостного хроматографа

Мировые производители жидкостных хроматографов, рейтинг, виды программного обеспечения

Классификация видов высокоэффективной жидкостной хроматографии и типы хроматографических систем в ВЭЖХ

Скоростная хроматография быстрого разрешения (RRLC или UPLC) как последнее достижение хроматографической науки для оптимизации методики

Адсорбционная хроматография и ее виды, преимущества и недостатки

Нормально-фазовая хроматография

Обращенно-фазовая хроматография, ее преимущества и недостатки, сравнение с нормально-фазовой хроматографией

Другие виды ВЭЖХ (краткий обзор)

Хроматография с гидрофильным взаимодействием (HILIC)

Хроматография с переносом заряда (CHARGE-TRANSFER HPLC)

Механизм хроматографического разделения в колонке, варианты поведения веществ

Механизмы удерживания и типы взаимодействия между аналитом, сорбентом и растворителем в ВЭЖХ

Хроматографический пик и его характеристики

Коэффициент емкости (фактор удерживания) K'

Селективность (относительное удерживание); критерии фактора емкости

Число теоретических тарелок (эффективность хроматографической системы). Причины ухудшения эффективности

Выбор критериев для числа теоретических тарелок

Фактор разрешения RS и его связь с коэффициентом емкости, селективностью и эффективностью

Асимметрия пика, причины возникновения, пути улучшения формы пика

Перегрузка хроматографической колонки, причины и следствия

Изократическое и градиентное элюирование, преимущества и недостатки

Виды градиентных систем, построение градиентов

Влияние температуры на селективность и эффективность разделения в ВЭЖХ

Силикагель, его структура и химия поверхности

Неподвижные фазы для ВЭЖХ, новые направления при их разработке; силикагели типов а и в, золь-гель технологии

Сорбенты для обращенно-фазной ВЭЖХ, методы создания модифицированных фаз, селективность фаз С18

Наиболее распространенные привитые фазы

Классификация фаз С18 по содержанию углерода

Устойчивость привитых силикагелей при высоких и низких значениях РН

Адсорбенты, не основанные на силикагеле

Высокотемпературная ВЭЖХ

Эквивалентность хроматографических колонок

Эндкеппинг и двойной энд-кеппинг, их влияние на разделяющую способность

Насосы для ВЭЖХ, устройство плунжерного насоса, градиентные насосы со смешиванием в области высокого и низкого давления, правила работы с насосной системой

Хроматографические колонки

- Устройство хроматографических колонок - Понятие о пустом объеме

- Влияние размера частиц на эффективность колонок и на величину давления

- Типы хроматографических колонок

- Подготовка колонки

- Нагрузка на колонку

- Скорость потока подвижной фазы

- Давление на входе в колонку

- Стабильность сорбента в колонке

- Предколонки, требования к ним, частота замены

- Другие способы защиты аналитической колонки от загрязнений

- Профилактические меры для поддержания колонки в рабочем состоянии

- Хранение и ремонт колонок для ВЭЖХ

- Диапазоны рН для хроматографических колонок

- Профилактические меры для поддержания работоспособности хроматографической колонки

- Требования к помещению для работы с жидкостным хроматографом

- Регенерация колонок для ВЭЖХ, схемы регенерации для различных видов хроматографических колонок (обращенно-фазные, HILIC, циано, ионообменные и др.)

- Как продлить срок службы хроматографической колонки

- Правила эксплуатации обращенно-фазовой колонки

- Параметры контроля изменения качества колонки

Проблемы воспроизводимости между параллельными вводами пробы

Подвижные фазы

- Роль подвижной фазы в процессе ВЭЖХ

- Элюирующая сила и селективность как основные характеристики подвижных фаз

- Выбор элюирующей силы подвижной фазы, треугольник селективности Снайдера

- Растворители для ВЭЖХ, требования к ним, преимущества и недостатки

- Величина рН подвижной фазы

- Ионная сила подвижной фазы

- Подготовка элюента

- Хранение подвижных фаз, рекомендуемые сроки

- Модификаторы подвижных фаз, их роль в хроматографическом процессе, виды модификаторов, свойства наиболее распространенных модификаторов

Органические растворители для приготовления подвижных фаз и пробоподготовки, требования к ним, правила работы, чистота, ассортимент

Фильтрация элюента при пробоподготовке

Роль буферных растворов в составе подвижных фаз

Дегазация элюента, виды дегазации, сравнительная характеристика по эффективности, особенности работы с водными растворителями

Вода для высокоэффективной жидкостной хроматографии, получение, требования, хранение

Пробоподготовка в высокоэффективной жидкостной хроматографии, цели, рекомендации по выбору растворителя

Химическая дериватизация компонентов пробы

Детекторы в ВЭЖХ, их сравнительная характеристика, преимущества и недостатки

Базовая линия, высокочастотные и низкочастотные шумы, соотношение сигнал-шум, дрейф базовой линии

Основные приемы проведения качественного анализа по данным ВЭЖХ, спектральные отношения пиков, ложноположительные и ложноотрицательные результаты

Основные приемы проведения количественного анализа по данным ВЭЖХ

Примеры расчетных формул, применяемых в количественном анализе ВЭЖХ для различных лекарственных форм

Статистическая обработка полученных результатов

Системы пригодности хроматографической системы, выбор критериев, примеры. Критерии разделяющей способности хроматографической системы

Некоторые проблемные ситуации и пути их решения

Виды взаимодействий на обращенно-фазной С18 поверхности и методы очистки колонок С18 в зависимости от структуры аналита и вида взаимодействия

Проблемы интегрирования плохо разделяемых пиков и разметка хроматограмм

Защитные крышки (SEQURITY CAPS) при пробоподготовке

Классификация хроматографических колонок по материалу наполнения согласно требованиям USP текущего издания (справочная информация отдельным приложением)