Онлайн-семинар
Ошибки и проблемы высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC TROUBLESHOOTING)

В материалах семинара использована актуальная информация по ошибкам и проблемам высокоэффективной жидкостной хроматографии, с которыми наиболее часто встречаются специалисты в своей работе. Семинар проводит специалист, кандидат фармацевтических наук, с опытом работы в исследовательской лаборатории по разработке методов анализа новых лекарственных средств методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в одной из крупнейших фармацевтических компаний мира. Материалы семинара включают в себя большое количество практических ситуаций и снабжены иллюстративным материалом.
После окончания каждого дня семинара – ответы на вопросы и помощь в практической работе.

Знания и методология,  полученные на данном семинаре, дадут возможность специалистам предприятий:
1) повысить квалификацию и личную эффективность как специалиста;
2) снизить процент брака в аналитической работе, что позволит существенно снизить затраты на повторное выполнение работы
3) значительно сэкономить средства, связанные с приобретением дорогостоящих хроматографических колонок.
4) снизить расход дорогостоящих органических растворителей, применяемых для приготовления подвижных фаз  

Категория слушателей: специалисты в области фармацевтического и химического анализа.

РАЗДЕЛ  I :
- БАЗОВЫЕ ПРИНЦИПЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ В ОБРАЩЕННО-ФАЗНОЙ ВЭЖХ;
 

РАЗДЕЛ  II (основной):
1) ШЕСТЬ ОСНОВНЫХ ПРАВИЛ ПОДХОДА  К ПРОБЛЕМАМ ВЭЖХ.
2) НАЖДЕНИЕ И ЛОГИЧЕСКОЕ ИЗОЛИРОВАНИЕ ПРОБЛЕМЫ.
3) МЕТАНОЛ ИЛИ АЦЕТОНИТРИЛ? ПРЕИМУЩЕСТВА И НЕДОСТАТКИ В СВЕТЕ ПРОБЛЕМНЫХ СИТУАЦИЙ.
4) О ЧЕМ ГОВОРИТ НАЗВАНИЕ МАТЕРИАЛА КОЛОНКИ?
5) ЗАГРЯЗНЕНИЕ УФ-ЯЧЕЙКИ ДЕТЕКТОРА, ПРИЗНАКИ ПРОБЛЕМЫ И ЕЕ РЕШЕНИЕ.
6) ЗАГРЯЗНЕНИЯ В ИНЖЕКТОРЕ, КАК ИЗБЕЖАТЬ ПРОБЛЕМ.
7) ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦА – НАСКОЛЬКО КРИТИЧНЫ ОШИБКИ?
8) НАСКОЛЬКО КРИТИЧНЫ ИЗМЕНЕНИЯ ТЕМПЕРАТУРЫ?
9) КРАТКАЯ СХЕМА РАБОТЫ ДЛЯ ОБРАЩЕННО-ФАЗНОГО МЕТОДА, ИСТОЧНИКИ ОШИБОК.
10) ЗАЩИТА КОЛОНКИ ОТ ЗАГРЯЗНЕНИЙ И АГРЕССИВНЫХ ЭЛЮЕНТОВ.
11) ГРАДИЕНТНОЕ ЭЛЮИРОВАНИЕ, ОСОБЕННОСТИ, ПРОБЛЕМЫ, ИСТОЧНИКИ ОШИБОК.
12) ПРИМЕСИ В ЭЛЮЕНТЕ ПРИ РАБОТЕ В ГРАДИЕНТНОМ РЕЖИМЕ.
13) ГРАНИЦА ПРОПУСКАНИЯ РАСТВОРИТЕЛЯ В УФ-ДИАПАЗОНЕ И ОШИБКИ, СВЯЗАННЫЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РАСТВОРИТЕЛЕЙ ВБЛИЗИ ГРАНИЦЫ ПРОПУСКАНИЯ.
14) СИСТЕМНЫЕ ПИКИ КАК ИСТОЧНИК ПРОБЛЕМНЫХ СИТУАЦИЙ
15) УЛЬТРАЗВУК,  ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В ПРОБОПОДГОТОВКЕ, ПРОБЛЕМЫ И ОШИБКИ.
16) КОРРОЗИЯ КОМПОНЕНТОВ ХРОМАТОГРАФА. КАК РЕШАТЬ ТАКУЮ ПРОБЛЕМУ.
17) ПОЧЕМУ ИМЕННО ФОСФАТНЫЕ БУФЕРЫ, КАК ИЗБЕЖАТЬ ПРОБЛЕМНЫХ СИТУАЦИЙ ПРИ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИИ?
18) НЕСМЕШИВАЮЩИЕСЯ РАСТВОРИТЕЛИ. БУДЬТЕ ВНИМАТЕЛЬНЫ!
19) НЕСОВПАДЕНИЕ СОСТАВА РАСТВОРИТЕЛЯ ПРОБЫ И ЭЛЮЕНТА КАК ИСТОЧНИК ПРОБЛЕМНОЙ СИТУАЦИИ.
20) ПИКИ «НА ОБРАТНОМ ГРАДИЕНТЕ». КАК К НИМ ОТНОСИТЬСЯ?
21) ЗАГАДОЧНАЯ СТРЕЛКА НА КОЛОНКЕ, УКАЗЫВАЮЩАЯ НАПРАВЛЕНИЕ ПОТОКА.
22) ПРОБЛЕМЫ НЕПРАВИЛЬНОГО ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ КОЛОНОК.
23) ПОТЕРЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ И РАЗРЕШЕНИЯ. В ЧЕМ ПРИЧИНЫ И ЧТО ДЕЛАТЬ.
24) РЕКОМЕНДУЕМЫЕ ГРАФИКИ РЕГЛАМЕНТНЫХ И ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ РАБОТ.
25) СЛУЧАЙНЫЕ ПИКИ. КАК К НИМ  ОТНОСИТЬСЯ?
26) ПРОБЛЕМЫ, СВЯЗАННЫЕ С ДАВЛЕНИЕМ В  ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ СИСТЕМЕ.
27) ПРОБЛЕМЫ, СВЯЗАННЫЕ С ФОРМОЙ ПИКА
- Расщепленные пики;
- Асимметрия пика (Tailing), расширение и потеря эффективности:
А) Диагностический этап
Б)  Химическая асимметрия
В)  Определение причин  и решение проблем асимметрии
28) ИЗМЕНЕНИЯ  УДЕРЖИВАНИЯ В ОДНОЙ И ТОЙ ЖЕ КОЛОНКЕ С ТЕЧЕНИЕМ ВРЕМЕНИ
29) ИЗМЕНЕНИЯ В УДЕРЖИВАНИИ/СЕЛЕКТИВНОСТИ ОТ КОЛОНКИ К КОЛОНКЕ
30) РАСШИРЕНИЕ ПИКОВ, ДИАГНОСТИКА И РЕШЕНИЕ.
31) ПРОБЛЕМЫ БАЗОВОЙ ЛИНИИ:
- Дрейф
- Систематический и несистематический шумы
32) «ПУТЕВОДИТЕЛЬ» ПО ПРОБЛЕМАМ ВЭЖХ (ХРОМАТОГРАММА, ПРИЧИНЫ ПРОБЛЕМЫ, ПУТИ РЕШЕНИЯ)
- Пики отсутствуют/пики очень малы
- Нет потока подвижной фазы
- Нет давления/Давление ниже обычного
- Давление выше обычного значения
- Справочная таблица по процедурам восстановления колонки
- Непостоянство времен удерживания
- Ухудшение или потеря разделения
- Расщепленные пики
- Асимметрия пика на начальных и последних  инжекциях (tailing и fronting)
- Закругленные верхушки пиков
- Дрейф базовой линии
- Шум базовой линии (систематический)
- Шум базовой линии (несистематический)
- Широкие пики
- Изменения в высоте пиков (одного или нескольких)
- Изменение в селективности
- Отрицательный пик (пики)
- Случайные пики
33) ПРОБЛЕМЫ ВЭЖХ В КАРТИНКАХ:
А) смешивание компонентов подвижной фазы;
Б) рН при разделении;
В) качество тетрагидрофурана;
Г) несовпадение растворителя образца и подвижной фазы;
Д) попадание воздуха в образец;
Е) влияние температуры элюента;
Ж) влияние скорости потока на разделение;
З)  проблемы дегазирования подвижной фазы;
И) течи в ВЭЖХ системе;
К) коллапс колонки;
Л) перегрузка колонки;
М) загрязнение колоночной фритты;
Н) влияние внеколоночных эффектов на разделение;
О) изменение времен удерживания
П) защита хроматографической колонки;
Р)  посторонние пики
С) влияние соотношения компонентов подвижной фазы на разделение
34) ПОЛЕЗНЫЕ СОВЕТЫ ПРИ РЕШЕНИИ ПРОБЛЕМ ВЭЖХ.
35) ВОПРОСЫ – ОТВЕТЫ ПО ПРОБЛЕМАМ ВЭЖХ:
1. «время жизни» хроматографической колонки;
2. непостоянство времен удерживания;
3. сдвиги (смещения) времен удерживания;
4. воспроизводимость результатов от колонки к колонке и от партии к партии колонки;
5. источники асимметрии пика;
6. воспроизводимость градиентных методов;
7. засорение хроматографической системы;
8. изменение числа теоретических тарелок;
9. изменение давления  в колонке;
10. колебания (флуктуации) в площади пиков;
11. случайные пики.
12. зависимость времен удерживания от рн;
13. кондиционирование хроматографической колонки;
14. гидрофобный коллапс;
15. шум базовой линии;
16. хранение колонки;
17. загрязнение колонки;
18. рН подвижной фазы;
19. перегрузка колонки;
20. «длительность жизни» хроматографической колонки;
21. обратная промывка колонки (column backflushing);
22. отрицательные пики;
36) НЕОЖИДАННОЕ РАЗДВОЕНИЕ ПИКОВ, ПЕРЕПИСКА С ХРОМАТОГРАФИСТОМ
37) ПРОБЛЕМЫ, СВЯЗАННЫЕ С ДАВЛЕНИЕМ В ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ СИСТЕМЕ:
а) Что является нормой? Расчетная оценка величины давления в хроматографической системе;
б) Высокое значение давления, применение in-line фильтров, примеры
в) Низкое значение давления
г) Нестабильность показаний давления
 

РАЗДЕЛ  III:
38) «ПОВЕДЕНИЕ» ОБРАЩЕННО-ФАЗНЫХ КОЛОНОК В 100% ВОДНОЙ ФАЗЕ, ЯВЛЕНИЕ DEWETTING («ГИДРОФОБНЫЙ КОЛЛАПС), ВОССТАНОВЛЕНИЕ КОЛОНКИ
39) СПРАВОЧНИК ПРОБЛЕМ ВЭЖХ:
1. Высокое давление в системе;
2. Отсутствие/понижение давления;
3. Колебания давления;
4. Неравномерность базовой линии;
5. Изменения  хроматографии, связанные  временами удерживания, формой  и  размерами пиков;
6. Проблемные ситуации с идентификацией веществ;
7. Проблемные ситуации с результатами количественного определения;

РАЗДЕЛ IV:
- РАБОТА С ДВУМЯ НАВЕСКАМИ СТАНДАРТНЫХ ОБРАЗЦОВ. СООТВЕТСТВИЕ СТАНДАРТОВ, ПОДХОД И КРИТЕРИИ

РАЗДЕЛ V:
- СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ДАННЫЕ О КОЛОНКАХ С 18: ПРОБЛЕМА «ЭКВИВАЛЕНТНЫХ» КОЛОНОК

РАЗДЕЛ VI:
- ЗАЩИТНЫЕ КРЫШКИ (SEQURITY CAPS) ПРИ ПРОБОПОДГОТОВКЕ КАК РЕВОЛЮЦИОННОЕ ИЗОБРЕТЕНИЕ В ТЕХНИКЕ ВЭЖХ

РАЗДЕЛ VII: ФИЛЬТРЫ ДЛЯ ВЭЖХ И СВЯЗАННЫЕ С НИМИ ПРОБЛЕМНЫЕ ВОПРОСЫ