ВЕРХ: школа хроматографіста. Актуальні питання та проблеми останніх років. Частина 5

Цей семінар є продовженням 1-ї, 2-ї, 3-ї та 4-ї частин цього ж семінару. Він побудований на питаннях слухачів – фахівців із високоефективної рідинної хроматографії, які працюють у лабораторіях контролю якості та розробки на фармацевтичних та хімічних підприємствах. Це актуальні питання та проблеми, зібрані за останні роки. Цей семінар може бути корисним і хроматографістам-початківцям, і фахівцям з невеликим досвідом, і «гуру». Матеріал викладається простою доступною мовою.

Знання та методологія, отримані на даному семінарі, дадуть можливість фахівцям підприємств:

1. підвищити кваліфікацію та особисту ефективність як фахівця;
2. знизити відсоток помилок та браку, що дозволить суттєво знизити витрати на повторне виконання роботи
3. знання методології виконання хроматографічних аналізів дозволить значно скоротити витрату дорогих розчинників

Категорія слухачів: фахівці у галузі фармацевтичного та хімічного аналізу. Запитання у процесі проведення семінару вітаються.

81. Розробка методики у обернено-фазовій ВЕРХ. Завдання: змінити селективність без істотної зміни загального часу аналізу. Як грамотно вибрати між метанолом та ацетонітрилом.
82. Чому збільшення вмісту органічного розчинника зменшує утримування в обернено-фазовій ВЕРХ, і як це слід враховувати при розробці методу?
83. Оптимізація поділу критичної пари піків. В якій послідовності доцільно змінювати тип нерухомої фази, рН рухомої фази, органічний модифікатор, температуру колонки, швидкість потоку та профіль градієнта?
84. Як зміна pH рухомої фази поблизу значення pKa аналіту може вплинути на утримування, селективність, форму піку та відтворюваність методу, і чому рекомендується відходити від pKa не менше ніж на дві одиниці pH?
85. Після декількох ін'єкцій основного компонента в холостій пробі (blank) з'являється пік, який поступово зменшується, з тим же часом утримування, при цьому робочий тиск і форма піків стандарту залишаються стабільними. Які експерименти дозволять відрізнити carry-over автосамплера від пізнього елюювання попереднього піку, забруднення колонки  та системного піку рухомої фази, і в якій послідовності їх проводити?
86. Як визначити, чи викликаний дрейф утримування випаровуванням органічного компонента з резервуара рухомої фази?
87. Як мікробне зростання у водній частині рухомої фази проявляється на хроматограмі та в роботі ВЕРХ-системи?
88. Чому polar-embedded RP-фаза може зменшувати хвости оснóвних сполук порівняно з класичною C18-фазою?
89. Чому заміна повністю пористих частинок на superficially porous particles може змінити селективність, навіть якщо хімія зв'язаної фази однакова?
90. Як відрізнити розщеплення піку через порожнину в колонці від розщеплення через дві форми аналіту в розчині?
91. Чому після переходу на інший хроматограф із тією самою колонкою і тією ж програмою градієнта необхідно порівнювати не лише часи утримування?
92. Які причини можуть призвести до зміни порядку виходу піків при збереженні загального типу RP-колонки?
93. Чому зменшення розміру частинок сорбенту не завжди призводить до покращення поділу конкретної пари речовин?
94. Які ознаки вказують на забруднення детектора, якщо шум виникає незалежно від встановленої колонки?
95. Які помилки приготування суміші вода/ацетонітрил можуть призвести до систематичного зсуву часів утримування від серії до серії?
96. Відмова лабораторії від методики з градієнтом, де у флаконах чистий буфер та 100% ацетонітрил, а градієнт починається з 0% органіки і потім її відсоток збільшується.
97. Чому результати після центрифугування та після мембранної фільтрації одного розчину можуть систематично відрізнятися? Чому центрифугування зразка не завжди є достатньою альтернативою мембранної фільтрації в RP-HPLC?
98. Чому однакове номінальне значення pH двох буферів, приготовлених різними способами, не завжди гарантує однакову хроматографічну поведінку?
99. Які причини можуть викликати відхилення показників тесту на придатність хроматографічної системи від встановлених у конкретній методиці граничних значень
100. Як зміна складу та типу органічного модифікатора може змінити селективність двох сполук, що мають близьку гідрофобність?