ВЭЖХ: школа хроматографиста. Актуальные вопросы и проблемы последних лет. Часть 5

Данный семинар является продолжением 1-й, 2-й, 3-й и 4-й частей этого же семинара. Он построен на вопросах слушателей – специалистов по высокоэффективной жидкостной хроматографии, работающих в лабораториях контроля качества и разработки на фармацевтических и химических предприятиях. Это актуальные вопросы и проблемы, собранные за последние годы. Данный семинар может быть полезен и начинающим хроматографистам, и специалистам с небольшим опытом, и «гуру». Материал излагается простым доступным языком.

Знания и методология, полученные на данном семинаре, дадут возможность специалистам предприятий:

1. повысить квалификацию и личную эффективность как специалиста;
2. снизить процент ошибок и брака, что позволит существенно снизить затраты на повторное выполнение работы
3. знание методологии выполнения хроматографических анализов позволит значительно сократить расход дорогостоящих растворителей

Категория слушателей: специалисты в области фармацевтического и химического анализа. Вопросы в процессе проведения семинара приветствуются.

81. Разработка методики в обращённо-фазной ВЭЖХ. Задача: изменить селективность без существенного изменения общего времени анализа.  Как грамотно выбрать между метанолом и ацетонитрилом.
82. Почему увеличение содержания органического растворителя уменьшает удерживание в обращённо-фазовой ВЭЖХ, и как это следует учитывать при разработке метода?
83. Оптимизация разделения критической пары пиков. В какой последовательности целесообразно изменять тип неподвижной фазы, pH подвижной фазы, органический модификатор, температуру колонки, скорость потока и профиль градиента?
84. Как изменение pH подвижной фазы вблизи значения pKa аналита может повлиять на удерживание, селективность, форму пика и воспроизводимость метода, и почему рекомендуется отходить от pKa не менее чем на две единицы pH?
85. После нескольких инъекций основного компонента в холостой пробе (blank) появляется постепенно уменьшающийся пик с тем же временем удерживания, при этом рабочее давление и форма пиков стандарта остаются стабильными. Какие эксперименты позволят отличить carry-over автосамплера от позднего элюирования предыдущего пика, загрязнения колонки и системного пика подвижной фазы, и в какой последовательности их следует проводить?
86. Как определить, вызван ли дрейф удерживания испарением органического компонента из резервуара подвижной фазы?
87. Как микробный рост в водной части подвижной фазы проявляется на хроматограмме и в работе ВЭЖХ-системы?
88. Почему polar-embedded RP-фаза может уменьшать хвосты оснóвных соединений по сравнению с классической C18-фазой?
89. Почему замена полностью пористых частиц на superficially porous particles может изменить селективность, даже если химия связанной фазы одинакова?
90. Как отличить расщепление пика из-за пустоты в колонке от расщепления из-за двух форм аналита в растворе?
91. Почему после перехода на другой хроматограф с той же колонкой и той же программой градиента необходимо сравнивать не только времена удерживания?
92. Какие причины могут привести к изменению порядка выхода пиков при сохранении общего типа RP-колонки?
93. Почему уменьшение размера частиц сорбента не всегда приводит к улучшению разделения конкретной пары веществ?
94. Какие признаки указывают на загрязнение детектора, если шум появляется независимо от установленной колонки?
95. Какие ошибки приготовления смеси вода/ацетонитрил могут привести к систематическому смещению времен удерживания от серии к серии?
96. Отказ лаборатории от методики с градиентом, где во флаконах чистый буфер и 100% ацетонитрил, а градиент начинается с 0% органики и потом её процента увеличивается.
97. Почему результаты после центрифугирования и после мембранной фильтрации одного раствора могут систематически различаться? Почему центрифугирование образца не всегда является достаточной альтернативой мембранной фильтрации в RP-HPLC?
98. Почему одинаковое номинальное значение pH двух буферов, приготовленных разными способами, не всегда гарантирует одинаковое хроматографическое поведение?
99. Какие причины могут вызывать отклонение показателей теста на пригодность хроматографической системы от установленных в конкретной методике граничных значений
100. Как изменение состава и типа органического модификатора может изменить селективность двух соединений, имеющих близкую гидрофобность?