ВЭЖХ: Полезные советы или грамотный подход к острым вопросам

Вопросы (и простые, и сложные) из области ВЭЖХ приветствуются

ЧАСТЬ 1

1) Почему качество ВЭЖХ колонки с течением времени изменяется?
2) Не ошибитесь при выборе  размера пор частиц неподвижной фазы
3) Почему именно фосфаты калия-натрия? Есть ли альтернатива?
4) рН – критический фактор в хроматографическом разделении полярных/ионных/ионизируемых аналитов.
- Изменение величины рН элюента: степень изменения и причины
- Влияние ненамеренного изменения рН элюента на размеры хроматографических пиков.
5) Как успеть выполнить хроматографическую работу, если используются свежеприготовленные растворы?
6) Критическая роль добавок и модификаторов в составе элюента
7) Почти дюжина не совсем обычных советов:
- Чем дегазировать, если дегазатор неисправен, а гелий – неподъёмно дорогой?
- Можно ли поворачивать колонку? Если да, то когда?
- «Боится» ли колонка ультразвуковой обработки?
- Можно ли обрабатывать образцы без ограничений ультразвуком?
- Сколько времени можно обрабатывать водой ОФ колонку?
- 100% ацетонитрил – полезен он колонке, или вреден?
- Изократика или градиент? Что выбрать?
- Что «полезнее» для хранения ОФ колонок: метанол или ацетонитрил?
- Посторонние пики в хроматограмме: ну сколько можно?
- роль силикагеля;
- влияние факторов окружающей среды;
- возможность загрязнения;
- чистота ацетонитрила;
- устойчивость определяемых веществ.
- Раздражает дрейф базовой линии при низкой длине волны? Есть решение!
8) Неожиданные острые вертикальные пики (spikes) на хроматограмме:
- Воздушные пузыри в насосе и детекторе
- Загрязненная входная фритта
- Детектор
- Электроника
- Другие причины (окружающая среда)
9) Асимметрия – «головная боль» ОФ ВЭЖХ
10) Растворитель для образца не совпадает с подвижной фазой? Ждите сюрпризов!
11) Чем же все-таки промывать хроматографическую систему?
12) Площади пиков изменяются. В чем могут быть причины?
- Изменение в инжектируемом количестве/объеме
- Изменение скорости потока
- Изменение длины волны
- Изменение величины рН
- Необратимая адсорбция
- Растворитель, не отвечающий требованиям

ЧАСТЬ 2

13) Водоросли, грибки, бактерии и прочая «живность» в ВЭЖХ.
14) Подвижной фазы не хватит. Добавим свеженькой! (???)
15) Еще дюжина «мелких» полезных советов:
- Какие фазы лучше применять для разделения кислот и оснований?
- Все ли фазы С18 можно применять для разделения сильных кислот?
- Какие элюенты предпочтительнее для  увеличения “продолжительности жизни” колонки?
- Как изменяется рН элюента при добавлении органики?
- Связь селективности и робастности с рКа аналита
- Изменение параметров хроматограммы при вариациях  рН от 3 до 5.
- Границы рН силикагеля
- Калия фосфат или аммония карбонат?
- Элюирование ионизированных субстанций
- рН элюента
- Влияние скорости потока на продолжительность анализа
16) Переносим методику на ВЭЖХ прибор другого производителя? Будьте бдительны!
17) Как определить, произошло ли что-то с сорбентом в колонке?
18) Фармакопейный  стандартный образец примеси перестал выпускаться. Проблема с регуляторным органом.
19) Влияние некоторых установок детектора (постоянной отклика детектора, Detector time constant, Peak  bandwidth) на хроматографическое разделение
20) Как повлияет на  хроматографическое разделение  (метод ВЭЖХ)  переход на колонку с меньшим внутренним диаметром при той же длине колонки?
21) Пики, элюирующие до пика растворителя (мертвого времени) – как такое может быть?
22) Какой вид соли заказать из каталога  для ВЭЖХ анализа? «Простенький» вопрос, не правда ли?
23) Чистота применяемых химических реактивов: настолько ли безобиден вопрос?
24) Проблема искажения формы пика в градиентной методике  (почти «детективная» история)  
25) Возможен ли перенос методики, разработанной для рефрактометрического детектора, на ультрафиолетовый
26) Будьте внимательны при выборе тетрагидрофурана для ВЭЖХ анализа!
27) В составе подвижной фазы ион-парный реагент? Будьте бдительны!